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《京城协和医学院》 2019年
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NOVA1在脂肪间充质干细胞成脂分化过程中的转录激活及他作用研究

林娜  
【摘要】:研讨背景RNA 构成蛋白 Noval(neuro-oncological ventral antigen 1)是神经特异性剪接因子。随着研究之深刻,人人发现Noval对肿瘤预后、能量代谢也有影响,并在脂肪组织也具有较高的发表。咱们的早期研究发现,脂肪来源的间充质干细胞(Adipose Tissue-Derived stem cells,ADSCs)成绩脂分化的进程中NOVA1基因表达升高,敲减NOVA1能够控制脂肪分化。基金研究将进一步探讨在ADSCs成绩脂分化过程中NOVA1的激活机制及其促进脂肪分化的体制。研讨目的1.探索脂肪特异转录因子对NOVA1的转录调控作用。2.察觉Nova1调控成脂分化的靶分子。研讨方法和结果1.脂肪特异转录因子对NOVA1的转录调控作用。主意:双萤光报告检测脂肪特异转录因子对NOVA1开行子的转录调控作用,染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)检测 ADSCs 美方 PPARy在NOVA1开行子的从容,实时定量PCR检测在ADSCs美方过表达或激活PPARγ对NOVA1发挥的调控。结果:PPARγ:RXRa转录因子复合物通过识别PPARγ应答元件(Peroxisome Prolifertors Responsive Element,PPRE)转录激活NOVA1开行子;PPARy在NOVA1开行子区PPRE附近有明显富集;激活或过表达PPARγ随后NOVA1的发表升高,PPARγ拮抗剂和克服态PPARy能够逆转NOVA1的发表升高。2.Nova1调控脂肪分化的靶分子。主意:全转录组表达谱芯片、生物信息学分析和临时定量PCR筛选出Noval调控的脂肪特异基因;敲减靶基因并成脂诱导,油红O和临时定量PCR检测对脂肪分化的影响;敲减NOVA1的基础上过表达靶基因,成绩脂诱导后油红O和临时定量PCR检测对脂肪分化的影响。结果:Noval能影响PPARy上游基因ACSL1、CD36、FASN、PLIN1的发表;敲减CD36、FASN、PLIN1都能克服脂肪分化;过表达FASN或PLIN1都能够部分挽救敲减NOVA1对脂肪分化抑制作用。研讨结论1.PPARγ:RXRα转录因子复合物促进NOVA1基因的转录。2.Nova1穿越影响FASN、PLIN1基因的发表调控ADSCs成绩脂分化。
【学位授予单位】:京城协和医学院
【学位级别】:院士
【学位授予年份】:2019
【列入号】:R329.2

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